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PCR实验室为什么要进行三区隔离?
PCR实验总是出现假阳性,明明没有加模板,结果却扩出了产物。如果这种现象频频出现,就要注意一下操作环境。这里涉及气溶胶的概念,气溶胶是由固体或液体小质点分散并悬浮在气体介质中形成的胶体分散体系,能在空气中滞留至少几个小时。
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PCR实验室各区域仪器设备配备通常如下:
(1)标准的PCR实验室试剂准备区: 仪器设备主要应有加样器、冰箱、天平、低速离心机、混匀器、可移动紫外灯等。可使用超净工作台作为试剂配制操作台面。
(2)标准的PCR实验室标本制备区仪器设备主要应有生物安全柜(尽量为B2, 可避免提取核酸在柜内反复循环,造成标本间交叉“污染”,出现假阳性结果。此外还应配备加样器、台式高速离心机(冷冻及常温)、台式低速离心机、恒温设备(水浴和/或干浴仪)、冰箱、混匀器和可移动紫外灯等。
(3)标准的PCR实验室扩增区主要仪器就是核酸扩增热循环仪(PCR仪,实时荧光或普通的)。热循环仪的电源应,并配备一个稳压电源或UPS,以防止由于电压的波动对扩增测定的影响。此外,根据工作需要,还可配备加样器、超净台等。
(4)标准的PCR实验室产物分析区:本区所使用的仪器设备可能有加样器、电泳仪(槽)、电转印仪、杂交炉或杂交箱、水浴箱、DNA测序仪、和等。在理想情况下,PCR实验室试剂准备、标本制备、扩增三个区域可设置缓冲间。在缓冲间内,可设置正压,使室内空气不流向室外,室外空气不流向室内
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PCR实验室又称为基因扩增实验室。PCR技术是实验结果的重要来源,根据这种分子生物学技术,可以扩增出特定的DNA片段,并利用基因含量来探索患者体内的病毒含量,精度可达到纳米级。该方法灵敏性强、特异性高、快捷、对样品要求低,已广泛应用于医院的临床诊断和防疫检测部门的疫病诊断。PCR实验室主要包括试剂准备区、样品处理区、核酸扩增区、产物分析区等四个区域。
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