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PCR实验室为什么要进行三区隔离?
试剂配制区(Ⅰ区):洁净的区域,保持微正压使得外界空气无法进入隔离污染源。并且阴性模板应该在此区加入PCR管并盖盖,严禁在此区域打开、存放装有DNA模板的离心管。
DNA模板添加区(Ⅱ区):压力比Ⅰ区低,保证内部空气不外泄,以免阳性模板的气溶胶对外界环境造成污染。
扩增及PCR产物分析区(Ⅲ区):保持负压,使得内部空气不外泄,以免扩增产物的气溶胶对外界环境造成污染。操作时压力遵循Ⅰ区→Ⅱ区→Ⅲ区单一方向进行,不可逆向进行。
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PCR实验室管理细则规范:
严格按照“试剂储存和准备区→样品标本处理区→扩增区→扩增产物分析区”的单向进行,不得逆向进入前一工作区。
非本实验室工作人员,未经允许不得进入。进修、实习或因科研活动需要进入实验室的人员,进入各实验区前须先熟悉本程序的各项规定,并在本实验室人员监督下,严格遵守执行,
在各区域的实验操作过程中,操作人员必须戴手套、口罩和帽子,并严格遵守操作规程。
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PCR实验室设计建设标准规范
各区域的功能与设备
试剂制备区主要为扩增试剂的准备,分装盒保存。主要设备有天平、冰箱、离心机、加样器、紫外灯。
样品制备区主要是样品的混样和测试样品的制备。其主要设备有冰箱、生物安全柜、离心机、加样器、振荡器、恒温水槽、上下水设备、废弃物容器、紫外灯。操作台是否使用生物安全柜、净化工作台,或工作台,要根据样品的性质和制备要求来决定,如疾控中心、临床医学实验室一般选择生物安全柜,植物、检疫等选择柜。
扩散区为pcr扩增反应系统的制备和模板的添加、核酸扩增。在生物安全柜(超净台)内进行加样,超净台气流方向宜选用垂直式。冰箱,生物安全柜,离心加样装置,废物容器,紫外灯等。
扩增产物分析区为扩增产物的分析区域。如果只使用全自动扩增检测仪,可将扩增区与扩增产物分析区合并为一个区。本区域所使用的仪器设备有、、加样器和水浴箱等。
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