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PCR实验室为什么要进行三区隔离?
PCR实验总是出现假阳性,明明没有加模板,结果却扩出了产物。如果这种现象频频出现,就要注意一下操作环境。这里涉及气溶胶的概念,气溶胶是由固体或液体小质点分散并悬浮在气体介质中形成的胶体分散体系,能在空气中滞留至少几个小时。
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PCR实验室为什么要进行三区隔离?
试剂配制区(Ⅰ区):洁净的区域,保持微正压使得外界空气无法进入隔离污染源。并且阴性模板应该在此区加入PCR管并盖盖,严禁在此区域打开、存放装有DNA模板的离心管。
DNA模板添加区(Ⅱ区):压力比Ⅰ区低,保证内部空气不外泄,以免阳性模板的气溶胶对外界环境造成污染。
扩增及PCR产物分析区(Ⅲ区):保持负压,使得内部空气不外泄,以免扩增产物的气溶胶对外界环境造成污染。操作时压力遵循Ⅰ区→Ⅱ区→Ⅲ区单一方向进行,不可逆向进行。
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在PCR实验室的设计和建造越来越受到建设单位重视的情况下,从PCR实验室平面布局,通风空调系统两个方面进行设计要点分析,提出了PCR实验室按照四个区域设计为宜,实验室设备的布置不仅考虑实用同时要兼顾疏散,气流组织和压力控制保证气流单向流动防止气溶胶污染,同时在房间内设定,变风量阀应对生物安全柜开启和关闭时房间的压差扰动,供PCR实验室的建设单位和设计同行的相关人员参考.
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